El Profesor Layton y la Llamada del Espectro (ESP)

Tres años antes de los acontecimientos del primer juego , el profesor Layton recibe una carta de su antiguo compañero de estudios Clark Triton. Afirma que “un gigante misterioso envuelto en niebla ha estado arrasando nuestras casas”. El profesor se dirige a la ciudad de Misthallery para investigar y se le une Emmy, su nueva asistente. ¿Cuál es el significado de toda la destrucción, y está relacionado con la leyenda del folclore del pueblo de un "espectro"? La historia que se desarrolla detalla cómo se conocieron el profesor Layton y su aprendiz, Luke.

El profesor Layton y el último espectrosigue la estructura que se ha convertido en un elemento básico de la serie, en la que al jugador se le presenta una sucesión de acertijos dispersos por todo el mundo del juego para resolver con lógica usando la pantalla táctil, con acertijos adicionales disponibles para descargar semanalmente.

En los lanzamientos japonés y norteamericano, el juego también incluye Professor Layton's London Life , un juego de rol adicional en el que el personaje del jugador vive en Little London con el profesor Layton y varios personajes de la serie. Los jugadores pueden personalizar su personaje con ropa especial y recolectar artículos y muebles. Algunos de estos ayudan al personaje del jugador a ingresar a ciertas áreas de la ciudad o realizar tareas que ayudan a la gente del pueblo.